Genotoxicidade

O teste de Ames, ou teste de mutação reversa bacteriana, introduzido por Bruce Ames e seu grupo no início da década de 1970, atualmente é amplamente empregado para avaliar o potencial mutagênico de compostos químicos.

Neste ensaio biológico, diferentes linhagens de Salmonella typhimurium possuem mutações em genes responsáveis pela síntese de histidina, portanto, essas linhagens não podem produzir esse aminoácido essencial.

O teste de Ames avalia a mutagênese de diferentes tipos de amostras (substâncias, água, extratos, alimentos, bebidas), investigando se mutações que retornam a um estado "prototrófico" (Mutação Reversa) podem ser induzidas, e desta forma permitindo a bactéria sobreviver no meio livre de histidina.

As linhagens de bactérias são espalhadas em uma placa de ágar com pequena quantidade de histidina, o que permite que as bactérias cresçam apenas por um tempo inicial e tenham a oportunidade de sofrer mutações. Quando a histidina é consumida, apenas as bactérias que sofreram mutação para obter a capacidade de produção espontânea de histidina sobreviverão.

Um resultado positivo indica que o produto químico testado é mutagênico e, portanto, pode atuar como cancerígeno, uma vez que o câncer é frequentemente associado a mutações genéticas no estudo oncológico.

O teste de Ames é considerado um ensaio rápido e conveniente para estimar o potencial carcinogênico porque os ensaios padrão em ensaios pré-clínicos são demorados (2 a 3 anos) e mais caros.

Embora sejam conhecidos falso-positivos e falso-negativos, o teste de Ames ainda é considerado útil pela alta correlação. De acordo com a Diretriz 471 da OCDE, são necessárias pelo menos cinco linhagens comprovadamente confiáveis e reprodutíveis entre laboratórios.

As cepas aplicadas são especialmente construídas para detectar mutações de deslocamento de quadro (TA-1537 e TA-1538) ou pontuais (TA-1531) para recuperar a capacidade de sintetizar histidina, para que diferentes mecanismos possam ser identificados.

Nós utilizamos a fração S9 de fígado de rato para mimetizar as condições metabólicas de mamíferos para que o potencial mutagênico dos derivados químicos gerados a partir do sistema hepático possa ser avaliado.

A equipe do LABEM está pronta para discutir a sua demanda para os ensaios de genotoxicidade, para fornecer suporte analítico confiável e robusto para avaliação de segurança de produtos químicos sintetizados.

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