Universidad Federal de Mato Grosso
La prueba de Ames, o prueba de mutación inversa bacteriana, introducida por Bruce Ames y su grupo a principios de la década de 1970, ahora se usa ampliamente para evaluar el potencial mutagénico de los compuestos químicos.
En este ensayo biológico, diferentes cepas de Salmonella typhimurium presentan mutaciones en los genes responsables de la síntesis de histidina, por lo que estas cepas no pueden producir este aminoácido esencial.
El test de Ames evalúa la mutagénesis de diferentes tipos de muestras (sustancias, agua, extractos, alimentos, bebidas), investigando si se pueden inducir mutaciones que vuelvan a un estado "prototrófico" (Reverse Mutation), permitiendo así que la bacteria sobreviva. medio libre de histidina.
Las cepas de bacterias se esparcen en una placa de agar con una pequeña cantidad de histidina, lo que permite que las bacterias crezcan solo por un tiempo inicial y tengan la oportunidad de mutar. Cuando se consume histidina, solo sobrevivirán las bacterias que han mutado para obtener la capacidad de producir histidina espontáneamente.
Un resultado positivo indica que el producto químico probado es mutagénico y, por lo tanto, puede actuar como carcinógeno, ya que el cáncer a menudo se asocia con mutaciones genéticas en estudios oncológicos.
La prueba de Ames se considera un ensayo rápido y conveniente para estimar el potencial carcinogénico porque los ensayos estándar en ensayos preclínicos consumen mucho tiempo (2 a 3 años) y son más costosos.
Aunque se conocen falsos positivos y falsos negativos, la prueba de Ames todavía se considera útil debido a su alta correlación. De acuerdo con la directriz 471 de la OCDE, se requieren al menos cinco cepas que demuestren ser confiables y reproducibles entre laboratorios.
Las cepas aplicadas están especialmente diseñadas para detectar mutaciones de cambio de marco (TA-1537 y TA-1538) o puntuales (TA-1531) para recuperar la capacidad de sintetizar histidina, de modo que se puedan identificar diferentes mecanismos.
Utilizamos la fracción S9 de hígado de rata para imitar las condiciones metabólicas de los mamíferos para poder evaluar el potencial mutagénico de los derivados químicos generados a partir del sistema hepático.
El equipo de LABEM está listo para discutir su demanda de ensayos de genotoxicidad para brindar un soporte analítico confiable y sólido para la evaluación de la seguridad de los productos químicos sintetizados.
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