Bundesuniversität Mato Grosso
Der Ames-Test oder bakterielle Rückmutationstest, der Anfang der 1970er Jahre von Bruce Ames und seiner Gruppe eingeführt wurde, wird heute häufig verwendet, um das mutagene Potenzial chemischer Verbindungen zu bewerten.
In diesem biologischen Assay weisen verschiedene Stämme von Salmonella typhimurium Mutationen in Genen auf, die für die Synthese von Histidin verantwortlich sind, daher können diese Stämme diese essentielle Aminosäure nicht produzieren.
Der Ames-Test bewertet die Mutagenese verschiedener Arten von Proben (Substanzen, Wasser, Extrakte, Lebensmittel, Getränke) und untersucht, ob Mutationen induziert werden können, die in einen "prototrophen" Zustand zurückkehren (Reverse Mutation), wodurch das Bakterium überleben kann histidinfreies Medium.
Die Bakterienstämme werden auf einer Agarplatte mit einer geringen Menge Histidin ausgestrichen, wodurch die Bakterien nur für eine erste Zeit wachsen und mutieren können. Wenn Histidin konsumiert wird, überleben nur Bakterien, die mutiert sind, um die Fähigkeit zur spontanen Produktion von Histidin zu erlangen.
Ein positives Ergebnis zeigt an, dass die getestete Chemikalie mutagen ist und daher als Karzinogen wirken kann, da Krebs in onkologischen Studien häufig mit genetischen Mutationen in Verbindung gebracht wird.
Der Ames-Test gilt als schneller und bequemer Test zur Abschätzung des kanzerogenen Potenzials, da Standardtests in vorklinischen Studien zeitaufwändig (2 bis 3 Jahre) und teurer sind.
Obwohl falsch positive und falsch negative Ergebnisse bekannt sind, wird der Ames-Test aufgrund seiner hohen Korrelation immer noch als nützlich angesehen. Gemäß der OECD-Richtlinie 471 sind mindestens fünf Stämme erforderlich, die sich als zuverlässig erwiesen haben und zwischen Laboratorien reproduzierbar sind.
Die verwendeten Stämme sind speziell konstruiert, um Frameshift- (TA-1537 und TA-1538) oder Punktmutationen (TA-1531) zu erkennen, um die Fähigkeit zur Histidinsynthese wiederherzustellen, sodass verschiedene Mechanismen identifiziert werden können.
Wir verwendeten die Rattenleber-S9-Fraktion, um die Stoffwechselbedingungen von Säugetieren nachzuahmen, so dass das mutagene Potenzial von chemischen Derivaten, die aus dem Lebersystem erzeugt wurden, bewertet werden konnte.
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